珍藏版 史上最全的基因编辑常用技术指南(9)
2023-03-16 来源:你乐谷
如上图:
1. 转座子由位于质粒主链中目标基因(蓝色)侧翼的一组反向重复序列(绿色)组成。第二个质粒包含用于表达转座酶的转座酶基因(红色);
2. 转座酶表达(红色星号)并结合反向重复序列(绿色);发生核酸内切酶反应,切割DNA;
3. 释放的转座子可以与带有TA二核苷酸DNA链结合(在人类基因组中有许多这样的位点),除去转座子后,原始质粒为空,然后质粒被细胞降解;
4. 转座酶在DNA中产生双链断裂,并允许转座子整合。
借助随手可得的多种强大有效的基因编辑方法,我们已经进入了基因编辑的黄金时代。相信在以后会有越来越多的工作将注重于完善这些技术,以确保基因编辑的高特异性和高活性。
【参考文献】
1. Genesis. 2000 Feb;26(2):99-109. Cre recombinase: the universal reagent for genome tailoring;
2. Nature. 2019 Oct 21. doi: 10.1038/s41586-019-1711-4. Search-and-replace genome editing without double-strand breaks or donor DNA;
3. Plasmids 101: A Desktop Resource Created and Compiled by Addgene March 2017 (3rd Edition);
4. CRISPR 101: A Desktop Resource Created and Compiled by Addgene May 2017 (2nd Edition).
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1. 转座子由位于质粒主链中目标基因(蓝色)侧翼的一组反向重复序列(绿色)组成。第二个质粒包含用于表达转座酶的转座酶基因(红色);
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3. 释放的转座子可以与带有TA二核苷酸DNA链结合(在人类基因组中有许多这样的位点),除去转座子后,原始质粒为空,然后质粒被细胞降解;
4. 转座酶在DNA中产生双链断裂,并允许转座子整合。
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【参考文献】
1. Genesis. 2000 Feb;26(2):99-109. Cre recombinase: the universal reagent for genome tailoring;
2. Nature. 2019 Oct 21. doi: 10.1038/s41586-019-1711-4. Search-and-replace genome editing without double-strand breaks or donor DNA;
3. Plasmids 101: A Desktop Resource Created and Compiled by Addgene March 2017 (3rd Edition);
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